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O MÉTODO DE BRADFORD . Princípio . O método de Bradford 11 é uma técnica para a determinação de proteínas totais que utiliza o corante de "Coomassie brilliant blue" BG-250. Este método é baseado na interação entre o corante BG-250 e macromoléculas de proteínas que contém aminoácidos de cadeias laterais básicas ou aromáticas.
- Dimas Augusto Morozin Zaia, C. T. B. V. Zaia, Jaim Lichtig
- 1998
O ensaio de proteína de Bradford foi desenvolvido por Marion M. Bradford em 1976. [1] É um procedimento analítico espectroscópico rápido e preciso [2] usado para medir a concentração de proteína em uma solução. A reação depende da composição de aminoácidos das proteínas medidas.
O ensaio de Bradford, que tem por base o azul brilhante de Coomassie, é o método mais usado para dosagem de proteínas totais, com faixa de detecção entre 20 e 2000 μg mL -1, e utiliza a albumina do soro bovino (BSA) como padrão, que é um reagente de baixo custo.
O método de Bradford é uma técnica para a determinação de proteínas totais que utiliza o corante de “Coomassie Brilliant Blue” CBB BG250. Este método é baseado na interação entre o corante Comassie BG-250 e macromoléculas de proteínas que contém aminoácidos de cadeias laterais básicas ou aromáticas.
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Uma curva-padrão é utilizada para determinar quantitativamente uma propriedade de uma amostra desconhecida a partir de uma amostra com a mesma propriedade conhecida. Por exemplo, é comum determinar a concentração de proteínas em uma amostra a partir de um método colorimétrico, o ensaio de Bradford.
Uma das técnicas mais utilizadas para detecção e quantificação proteica em diversos meios é a proposta por Bradford (1976), onde um reagente denominado “Coomassie Brilliant Blue – BG-250” ou Azul Brilhante de Coomassie (Figura 3) reage com as proteínas presentes nas amostras em uma solução ácida.
O método de biureto tem sido aplicado para determinar a concentração de proteínas totais em diversos meios, sendo eles: soro ou plasma sangüíneo 15,16,18,19, líquido cérebro espi-nhal (líqüor) 20,21, urina22-24, alimentos25-29, saliva30, fibrino-gênio31 e tecido animal32.