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O teste de ELISA, que vem do inglês “Enzyme Liked Immunosorbent Assay” (Ensaio de Imunoabsorção Enzimática), permite a detecção de antígenos (Ag) e anticorpos (Ac) através de reações enzimáticas, por isso, se diz um teste imunoenzimático.
- DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS VIROSES
- 1. Importância da pesquisa de antígenos e/ou anticorpos no diagnóstico laboratorial
- 2. Testes sorológicos
- Ensaio imunoenzimático (ELISA)
- 1. Ensaios para antígenos
- 2.1 Método direto
- 2.2 Método indireto
- 2.3 Método para captura para anticorpos IgM
- AULA PRÁTICA: Ensaio imunoenzimático para detecção do antígeno de superfície do vírus da hepatite B (HBsAg)
- Leitura visual
O diagnóstico de certeza de um processo infeccioso é a demonstração do patógeno ou de seus produtos nos tecidos ou fluidos biológicos. Esta demonstração, no caso de uma infecção viral, pode ser feita de forma direta ou indireta. Como demonstração direta, temos o isolamento do agente etiológico (por exemplo, ovos embrionados, animais de laboratório ...
exame laboratorial de uma virose humana serve não só para confirmar uma dada infecção, ou uma suspeita clínica, mas também para identificar o tipo do agente causal e assim contribuir para a avaliação do clínico, para o paciente e a comunidade em geral. Situações importantes no diagnóstico virológico: No esclarecimento de infecções com sintomas e si...
Os testes sorológicos ou imunoensaios são técnicas para a detecção e quantificação de antígenos ou anticorpos, podendo utilizar reagentes não-marcados ou reagentes marcados. Os ensaios com reagentes não-marcados, como precipitação e aglutinação, possuem sensibilidade de detecção menor, pois é necessário que se formem grandes complexos antígeno-anti...
O ELISA é um método no qual a reação antígeno-anticorpo é monitorada por medida da atividade enzimática. Desempenha um papel muito importante no laboratório clínico, pois, além da elevada sensibilidade comparável à do radioimunoensaio, apresenta as vantagens de utilizar reagentes estáveis, estar livre das exigências de trabalhar com radioisótopos e...
A fase sólida é sensibilizada com anticorpo específico. A amostra em teste, onde se vai pesquisar o antígeno, é incubada com a fase sólida e, a seguir, incuba-se com excesso de anticorpo específico marcado com a enzima. A reação é revelada pela adição do substrato. A taxa de degradação é proporcional a concentração do antígeno + anticorpo antígeno ...
As placas são sensibilizadas com antígenos, que reagirão com os anticorpos da amostra., incubando-se em seguida com o antígeno específico marcado com a enzima.
As placas são sensibilizadas com o antígeno. Segue-se a incubação com a amostra teste. O conjugado empregado utilizada antiimunoglobulina humana que reage com o anticorpo da amostra capturado pelo antígeno e a reação e revelada com a solução cromógena. O grau de degradação do substrato, indicado normalmente pela intensidade da cor da solução, é pro...
A fase sólida é sensibilizada com anti-IgM específico para a região Fc. Os soros em teste são incubados, havendo a captura de qualquer IgM da amostra. A seguir incuba-se com antígeno marcado ou antígeno não marcado, seguindo de anticorpo específico marcado
Este ensaio baseia-se na metodologia direta do tipo sanduíche. Anticorpos anti-HBs são adsorvidos nas cavidades da fase sólida. Antígeno HbsAg, caso presente na amostra do soro teste, irá reagir especificamente com o anticorpo anti-HBs capturado na fase sólida. A placa é em seguida incubada com o conjugado anti-HBs/peroxidase. O anticorpo do conjug...
Observar a placa ligeiramente inclinada sobre uma superfície branca, com boa iluminação. Considerar como positivas as amostras que apresentarem qualquer diferença perceptível de cor em relação aos controles negativos, que devem ser incolores.
ELISA é um teste imunoenzimático indicado principalmente para detectar infecções, como HIV, sífilis, toxoplasmose, Zika, hepatites A, B ou C, ou candidíase, ou doenças autoimunes, câncer ou alergias, por exemplo.
Os imunoensaios enzimáticos (EIA) são usados para visualizar e quantificar antígenos. Eles usam um anticorpo conjugado a uma enzima para se ligar ao antígeno, e a enzima converte um substrato em um produto final observável. O substrato pode ser um cromógeno ou um fluorogênio.
O teste de “ELISA” (do inglês Enzyme “ Linked ImmunonoSorbent Assay) se baseia reações antígeno-anticorpo detectáveis através de reações enzimáticas. A enzima mais comumente utilizada nestas provas é a peroxidase, que catalisa a reação de desdobramento da água oxigenada (H2O2) em H2O mais O2.
O teste de ELISA é responsável pela detecção de diferentes doenças infecciosas, uma vez que a maioria dos agentes patológicos leva à produção de imunoglobulinas. Também pode ser utilizado no diagnóstico de doenças auto-imunes ou alergias.
11 de out. de 2013 · O termo ELISA vem do inglês Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, que em português equivale a Ensaio Imunoenzimático. É um dos métodos imunológicos mais utilizados para quantificar a concentração de antígenos e anticorpos, por apresentar grande sensibilidade e especificidade.
