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O método de Bradford 11 é uma técnica para a determinação de proteínas totais que utiliza o corante de "Coomassie brilliant blue" BG-250. Este método é baseado na interação entre o corante BG-250 e macromoléculas de proteínas que contém aminoácidos de cadeias laterais básicas ou aromáticas.
- Dimas Augusto Morozin Zaia, C. T. B. V. Zaia, Jaim Lichtig
- 1998
O ensaio de proteína de Bradford foi desenvolvido por Marion M. Bradford em 1976. [ 1] É um procedimento analítico espectroscópico rápido e preciso [ 2] usado para medir a concentração de proteína em uma solução. A reação depende da composição de aminoácidos das proteínas medidas.
Aprenda a quantificar a concentração de proteínas totais em folhas e raízes de plantas usando o reagente azul brilhante de Coomassie. Siga os passos para preparar a curva padrão, realizar a leitura da absorbância e avaliar o perfil protéico em gel de poliacrilamida.
O método de Bradford é uma técnica para a determinação de proteínas totais que utiliza o corante de “Coomassie Brilliant Blue” CBB BG250. Este método é baseado na interação entre o corante Comassie BG-250 e macromoléculas de proteínas que contém aminoácidos de cadeias laterais básicas ou aromáticas.
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O método de Bradford é rápido, sensível e sujeito a poucos interferentes que eventualmente podem influenciar na quantificação proteica final das amostras (Read & Northcote, 1981). De acordo com Bradford (1976), Read & Northcote (1981), e Zaia et al.
Esta técnica pode ser utilizada para dosar as proteínas antes do ensaio de caspases. Feito em placas de 96 poços. Reagente: 1 do pequeno (reagente de cobre) para 50 do grande. Curva: 10 mL de cada um dos padrões (albumina: 0,125; 0,250 ) e 200 mL do reagente. Incubar 30 minutos a 37 ° C e ler em 562 nM.
Uma curva-padrão é utilizada para determinar quantitativamente uma propriedade de uma amostra desconhecida a partir de uma amostra com a mesma propriedade conhecida. Por exemplo, é comum determinar a concentração de proteínas em uma amostra a partir de um método colorimétrico, o ensaio de Bradford.
